Какую пробирку выбрать для анализа С-пептида и инсулина?

Инсулин и С-пептид представляют собой пептидные гормоны, вырабатываемые бета-клетками островков поджелудочной железы.  Эти аналиты требуются для диагностики сахарного диабета и контроля терапии. Однако на их стабильность влияет ряд преаналитических факторов, таких как: добавка (наполнитель) в пробирке для сбора крови, температура хранения и продолжительность от момента взятия крови до проведения исследования.

Ранее были получены противоречивые данные о стабильности этих аналитов в плазме ЭДТА, по сравнению с сывороткой.

Целью проведенного исследования было изучение влияния типа образца (плазма и сыворотка), температуры хранения и времени от момента взятия крови до проведения центрифугирования, а также изучения стабильности инсулина и С-пептида в крови человека.

В исследовании принимало участие десять здоровых взрослых людей, не страдающих диабетом, у 5 из которых кровь брали натощак, при соблюдении «голодного» периода 8-10 часов, а оставшиеся 5 добровольцев сдавали кровь после приема пищи через 30 минут-2 часа. У каждого участника было взято по 40 мл крови в вакуумные пробирки с активатором свертывания и гелем и в вакуумные пробирки с К2-ЭДТА[WU1] , а также в педиатрические пробирки с теми же наполнителями, объемом 0,6 мл и 0,5 мл соответственно. Педиатрические пробирки использовались для образцов, которые хранились как цельная кровь, для центрифугирования в разные моменты времени, чтобы избежать аликвотирования цельной крови. Образцы крови центрифугировали немедленно или через определенные промежутки времени (через 8, 12, 48 и 72 часа). Отцентрифугированные образцы крови делили на аликвоты и после измерений исходного уровня на иммунохемилюминисцентном анализаторе, хранили при комнатной температуре, при температуре 2-8°C и при температуре -20°С в течение определенного периода времени, начиная с 4 часов до 30 дней. Замороженные образцы перед анализом оттаивали один раз в течение 20 минут до комнатной температуры (выдерживали при температуре 18-26°C). Педиатрические пробирки, которые не были отцентрифугированы в течение 1 часа, хранились при комнатной температуре для дальнейшего центрифугирования с временными интервалами 8 часов, 12 часов, 48 часов и 72 часа. Было рассчитано процентное отклонение (PD) от исходного уровня, и изменение, превышающее общую погрешность биологической вариации, считали клинически значимым.

С-пептид был более стабилен в образцах сыворотки, чем в плазме (PD -5%, против -13%), в условии хранения при температуре 2-8°С в течение 7 дней, и был наиболее нестабилен при комнатной температуре, когда центрифугирование было отсрочено (PD -46% в плазме и -74% в сыворотке через 48 часов). 

Инсулин был более стабилен в плазме, чем в сыворотке, с минимальной PD -1%, в условиях хранения при температуре -20°C в течение 30 дней. Когда образцы выдерживались при комнатной температуре в течение 72 часов, PD составляла -23% в плазме и -80% в сыворотке.

Мнение специалиста: 

Результаты исследований показали, что С-пептид более стабилен в сыворотке, при условии немедленного центрифугирования и хранения образца в холодильнике или в морозильной камере, в то время как инсулин оказался более стабильным в плазме с ЭДТА.  Даже при отсрочке центрифугирования и разделения, образцы с ЭДТА пригодны для анализа инсулина в условиях комнатной температуры (в течение 48 часов). Полученные результаты помогут сотрудникам лабораторий в выборе пробирок.