Влияние добавок в пробирках на результаты исследования уровня глюкозы

Двуцентровое поперечное исследование проводилось в университетской больнице Уппсалы, Швеция, и университетской больнице Парацельса в Зальцбурге, Австрия. В рамках проекта были охарактеризованы европейские группы пациентов, состоящие из детей и подростков в возрасте от 6 до 18 лет с ожирением, а также лиц с нормальным весом, с акцентом на секрецию инсулина и метаболизм глюкозы. Для контрольного сравнения были собраны образцы крови в пробирки с K2-EDTA от восьми здоровых взрослых добровольцев, помещены в ледяную суспензию, центрифугированы при температуре +4 °C при 2500 xg, разделены на аликвоты и заморожены при -70 °C. Одна часть этих подготовленных пар аликвот затем отправлялась на сухом льду в университетскую больницу Зальцбурга для лабораторного анализа, а другая размораживалась и анализировалась в лаборатории Уппсалы. Таким образом, преаналитические условия были идентичны для всех пар аликвот. В общей сложности в ходе исследования было получено 16 840 результатов измерения уровня глюкозы, некоторые из которых были получены от пациентов натощак, а некоторые – во время перорального глюкозотолерантного теста (ПГТТ). В Уппсале использовалась пробирка Na-F/C (Greiner Bio-One, Австрия), содержащая смесь Na2EDTA, фторид натрия, лимонную кислоту и цитрат натрия, а в Зальцбурге – пробирка с лития гепарином (LH) (Sarstedt, Германия). 

Результаты исследования

В ходе исследования ученые наблюдали существенную разницу в результатах измерения уровня глюкозы (N = 16 840) между двумя центрами: Зальцбургом (Австрия) и Уппсалой (Швеция) (P < 0,001). Исключив различия в характеристиках пациентов между двумя группами как причину такого результата, были исследованы другие преаналитические факторы. В итоге обоснованием причины различия остались только пробирки (тип добавки), используемые для сбора крови. Для подтверждения гипотезы в каждом центре были собраны еще два образца крови в каждую из этих пробирок. В результате исследования действительно была обнаружена систематическая погрешность между двумя типами пробирок. На основании полученных результатов, а также литературных данных, были применены поправочные коэффициенты, включая коэффициент из собственного эксперимента.

Что случилось

 Несмотря на глубокую и тщательную гармонизацию дизайна исследования, включая этап валидации для обеспечения сопоставимости аналитических методов, был упущен из виду тот факт, что для валидации аналитических методов использовалась одна и та же пробирка, а для фактического сбора крови у участников исследования использовались разные пробирки. Это привело к систематическому снижению значений в популяции Зальцбурга, поскольку гликолиз ингибируется Na-F/C гораздо лучше, чем LH.

Вывод

Правила использования определенных пробирок для сбора крови, ингибирующих гликолиз, для измерения уровня глюкозы различаются в разных странах.