Оценка стабильности 20 биохимических аналитов в образцах сыворотки при нестандартных температурных условиях хранения

Условия транспортировки образцов крови могут оказывать критическое влияние на стабильность аналита и точность результатов анализа.

В данном исследовании оценивалось влияние многодневного хранения образцов при температуре 30 °C и 0 °C, что приблизительно соответствует транспортировке в летний период и транспортировке в контейнерах со льдом.

Методы

Венозную кровь собирали у 16 здоровых испытуемых в четыре пробирки (А, B, C, D) содержащие активатор свертывания и гель. Все пробирки переворачивали и оставляли на 30-60 минут при комнатной температуре (20-25 °C) для формирования сгустка. После этого пробирки A и B центрифугировали в течение 10 минут при 1500 g, в то время как пробирки С и D оставляли без центрифугирования. Из всех пробирок отбирались аликвоты объемом 500 мкл для использования в качестве базового контроля, которые в дальнейшем подвергались замораживанию и хранению при -20 °C до проведения анализа. После извлечения аликвоты пробирку А закрывали крышкой и хранили в холодильнике (2-8 °C). Пробирки B, C и D помещали в контролируемый инкубатор, установленный на температуру 30 °C, с поддержанием температуры в пределах ±1 °C.

После 24-часовой (±2 ч) и 72-часовой (±4 ч) инкубации из каждой пробирки «охлажденной» и «инкубированной» при температуре 30 °C отбирали тестовые аликвоты, а также аликвоты для замораживания для последующего анализа. Для имитации потенциальных условий транспортировки образцов была взята дополнительная пробирка, которую после центрифугирования и отделения сыворотки помещали в специальный контейнер и создавали температуру хранения 0 °C в течение 24 и 72 часов.

Каждый образец анализировался по 20 распространенным биохимическим показателям: альбумин, щелочная фосфатаза (ЩФ), аланинаминотрансфераза (АЛТ), аспартатаминотрансфераза (АСТ), общий билирубин, азот мочевины крови (АМК), кальций, углекислый газ, холестерин, хлорид, креатинин, глюкоза, липопротеины высокой плотности (ЛПВП), фосфат, калий, натрий, общий белок, триглицериды, мочевая кислота и С-реактивный белок (hs-СРБ) и сравнивался со значениями парного контрольного образца. Были рассчитаны средние абсолютные и/или относительные отклонения, которые сравнивались с допустимыми пределами CLIA.

Результаты

Образцы сыворотки, центрифугированные после сбора крови и хранившиеся при температуре 30 °C в течение 24 или 72 часов, соответствовали критериям приемлемости для всех оцениваемых аналитов, за исключением 72-часовой АЛТ, общего билирубина, диоксида углерода, креатинина и натрия. Многие аналиты были нестабильны при температуре 30 °C в нецентрифугированной цельной крови, при этом только альбумин, ЩФ, общий билирубин, холестерин, ЛПВП, общий белок, триглицериды, мочевая кислота и высокочувствительный С-реактивный белок оставались стабильными до 72 часов. Для образцов сыворотки, хранившихся при температуре 0 °C, все 24-часовые и 72-часовые аналиты показали отклонения в пределах допустимых значений.