Измерение уровня глюкозы в крови является одним из основных скрининговых тестов лабораторной диагностики. Ранняя диагностика заболевания и определение групп риска по сахарному диабету (СД) является первоочередной задачей современного скрининга по профилактике и выявлению необратимых изменений и осложнений СД. В связи с этим возникает необходимость постоянного мониторинга уровня глюкозы у лиц с диагнозом СД и групп риска.
Глюкоза является нестабильным аналитом, что определяет принципиальную значимость выбора первичной пробирки, сроков хранения и условий доставки образца для получения точных результатов.
Согласно действующим международным рекомендациям, специализированными пробирками для определения глюкозы являются пробирки, содержащие в качестве стабилизатора глюкозы фторид натрия (NaF), обеспечивающие длительное сохранение аналита посредством ингибирования гликолиз распада. Однако высокая стоимость таких пробирок и ограниченное количество потенциально выполнимых исследований с данным типом стабилизатора/пробирок существенно ограничивают возможности их практического применения.
Ниже представлены данные клинического исследования, проведенного на базе Эксетерского центра клинических исследований в Лондоне в сентябре 2019 г., в ходе которого были проанализированы альтернативные варианты пробирок для определения уровня глюкозы.
У всех пациентов, принимавших участие в исследовании, проводили взятие венозной крови натощак сразу в три типа пробирок: с натрия фторидом (NaF), с этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА) и с активатором свертывания. Пробирки центрифугировали при стандартных параметрах на скорости 3000 оборотов 10 минут в течение 30 минут после взятия.
Все отобранные образцы, в соответствии с условиями хранения, были распределены таким образом, что часть пробирок:
- центрифугировали, аликвотировали и хранили в замороженном виде при температуре -20°C;
- центрифугировали, аликвотировали и хранили в условиях комнатной температуры;
- не центрифугировали и хранили в холодильнике (на хладоэлементах);
- не центрифугировали и хранили в условиях комнатной температуры.
В дальнейшем в интервале через 2, 6, 12 и 24 часа после взятия проб ранее не центрифугированные образцы аликвотировали и/или цетрифугировали и аликвотировали (в зависимости от первичной подготовки), и помещали в морозильную камеру с температурой -20°С.
В качестве эталонных значений были использованы результаты, полученные из образцов, изначально центрифугированных, аликвотированных и помещенных в морозильную камеру в температуру -20°C. Уровни глюкозы в образцах, хранившихся в других условиях, оценивали в разные промежутки времени, сравнивая с эталонными значениями показателя.
По результатам сравнения всех образцов были получены следующие данные:
Не центрифугированные образцы с NaF и ЭДТА (серые пробирки), хранившиеся в холодильнике, сохраняли стабильность в течение 6 часов, а с активатором свертывания – только 2 часа.
В итоге в отсутствии центрифугирования при комнатной температуре отмечено быстрое снижение уровня глюкозы во всех пробирках, за исключением пробирок с NaF. В связи с чем для сохранения стабильности аналита в таких случаях возникает необходимость использования хладоэлементов или немедленного центрифугирования. Эффект стабилизации образца при низкой температуре обусловлен снижением клеточного метаболизма. При этом было обнаружено, что в отсутствии центрифугирования низкая температура хранения стабилизирующего эффекта не оказывала.
Таким образом, образцы крови, центрифугированные сразу после взятия, сохраняли стабильность как на хладоэлементах, так и при комнатной температуре, даже через 24 часа, независимо от типа использованной первичной пробирки.
Подводя итоги, можно сделать вывод, что оптимальным типом пробирок для определения глюкозы являются пробирки с натрия фторидом (NaF). Однако, в ряде случаев, при соответствующей преаналитической обработке допустимо использование пробирок с активатором свертывания, при условии немедленного центрифугирования и хранения образцов при комнатной температуре не более 24 часов. Кроме того, пробирки с активатором свертывания, помимо глюкозы, пригодны для широкого перечня биохимических показателей. В случае использования пробирок с ЭДТА, их необходимо поместить на хладоэлементы, и провести исследование не позднее 6 часов после взятия.
Однако, учитывая ограниченный размер выборки данного наблюдения, существует необходимость проведения дальнейших исследований по поиску других возможных альтернатив для определения концентрации глюкозы.
Для написания статьи использовались следующие источники:
1) Nakanga WP, Balungi P, Niwaha AJ, Shields BM, Hughes P, Andrews RC, Mc Donald TJ, Nyirenda MJ, Hattersley AT. Alternative pre-analytic sample handling techniques for glucose measurement in the absence of fluoride tubes in low resource settings. PLoS One. 2022 Feb 28;17(2):e0264432. doi: 10.1371/journal.pone.0264432. PMID: 35226681; PMCID: PMC8884485. DOI: 10.1371/journal.pone.0264432
2) Biblioteca nacional de medicina
Prueba de glucosa en la sangre
Prueba de glucosa en la sangre: Prueba de laboratorio de MedlinePlus
