Гликированный гемоглобин (HbA1c) отражает средний уровень гликемии за 120-дневную продолжительность жизни эритроцитов. Американская диабетическая ассоциация рекомендует HbA1c в качестве маркера диагностики и контроля сахарного диабета (СД). По данным Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI), рекомендуемым образцом для измерения HbA1c считается цельная кровь с этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА) или гепарином. При этом одной из задач преаналитического этапа является получение качественного образца. По данным зарубежных авторов, 10-20% всех непригодных для исследования образцов составляют недозаполненные кровью пробирки. Это актуально, особенно когда речь идет о пациентах с плохим венозным доступом и тонкими хрупкими венами. Примером таких пациентов могут быть диабетики.
Целью данного исследования было сравнение измеренных концентраций HbA1c в пробирках, недостаточно заполненных и корректно заполненных образцами крови.
Материалы и методы
Исследование было проведено в марте 2022 года на базе клинической биохимической лаборатории Университета Бюлент Эджевит в г. Зонгулдак, Турция.
Для сравнения концентраций HbA1c были взяты образцы крови у 109 взрослых пациентов в пробирки, объемом 2 мл, содержащие К3-ЭДТА. У каждого пациента было взято две пробирки, одна из которых была заполнена корректно, а другая – недозаполнена. Недозаполненные образцы были разделены на три группы (группа 1, N = 44; группа 2, N = 36; группа 3, N = 29) в зависимости от степени заполнения пробирки нужным объемом биоматериала: 0,5 мл и ниже (<25%); 0,5-1,0 мл (25-50%) и 1,0-2,0 мл (>50%) соответственно.
Измерения HbA1c проводили на анализаторе Cobas 6000 c 501 (Roche Diagnostics, Мангейм, Германия). Результаты HbA1c, % сравнивали с помощью t-критерия и знакового рангового статистического метода Уилкоксона (SPSS Inc., Чикаго, США). Анализ смещения проводился с использованием Microsoft Excel 4.0.
Результаты исследований
Результаты исследований показали, что при сравнении недостаточно наполненных пробирок с парными наполненными пробирками, статистически значимая разница наблюдалась только в пробирках, заполненных менее чем на 25% (P = 0,030). Кроме того, был проведен анализ систематической ошибки между парными пробирками, в соответствии с диагностическим пороговым значением 6,5%. Смещение было более выраженным в случае, когда пробирки для крови были заполнены на 50% (1,1%); при этом концентрации HbA1c были ниже диагностического порога (6,5%).
Таким образом было показано, что заполнение ЭДТА пробирок кровью только до 25% может привести к статистически значимой разнице в уровне HbA1c. Во избежание получения клинически недостоверных результатов, объем пробирки, по данным исследователей, должен быть заполнен как минимум на 50%.
Выводы
Результаты исследований показывают, насколько важно заполнять пробирки кровью корректно.
В соответствии со стандартом ГОСТ Р ИСО 6710-2021 при взятии венозной крови допустимый предел отклонения от указанного отбираемого объема пробы составляет ±10%, что гарантирует точное соотношение крови и реагента в пробирке.
Для написания статьи использовались следующие источники:
