По состоянию на 30 декабря 2021 года зарегистрировано свыше 285 млн случаев заболевания по всему миру; подтверждено более 5 млн. летальных исходов заболевания, – что делает пандемию COVID-19 одной из самых смертоносных в истории.
При этом у инфицированных пациентов были обнаружены, в основном, положительные антитела IgM к SARS-CoV-2 через 7-8 дней после начала заболевания. Титры IgG в период выздоровления были более чем в четыре раза выше, чем в острой фазе. Это указывает на то, что серологическое обнаружение специфических антител имеет решающее значение для быстрой идентификации SARS-CoV-2.
В начале 2014 года одно из исследований показало, что различные добавки в пробирках для сбора крови могут влиять на определение концентрации алкоголя. Кроме того, было обнаружено, что образцы ДНК, извлеченные из крови с использованием двух разных антикоагулянтов (пробирки с гепарином и ЭДТА-К2), дали аналогичные результаты. Однако оставалось неясно, влияет ли наполнитель в вакуумных пробирках для сбора крови на обнаружение антител IgM и IgG к SARS-CoV-2.
В исследовании, опубликованном в журнале International Journal of Nanomedicine, говорится о влиянии различных типов вакуумных пробирок на обнаружение антител IgM и IgG к SARS-CoV-2 с помощью иммунохроматографического анализа с коллоидным золотом (GICA).
Ранее уже было выяснено, что ЭДТА-К2 оказывает антикоагулянтное действие, поскольку может хелатировать большое количество ионов кальция в крови. Поэтому вакуумные пробирки с К2ЭДТА обычно применяются к образцам крови в качестве антикоагулянта в клинических условиях. Однако это может стать причиной агрегации тромбоцитов в крови отдельных пациентов и привести к псевдотромбоцитопении.
Оставался неясным вопрос, может ли ЭДТА-К2 повлиять на обнаружение антител на основе GICA.
В рамках исследования было установлено, что ЭДТА-К2 усиливает положительный сигнал антител за счет хелатирования коллоидного золота и повышает чувствительность обнаружения антител IgM и IgG к SARS-CoV-2 при использовании GICA. Коллоидные частицы золота не могут быть хелатированы и агрегированы цитратом натрия, гепарином лития и коагулянтами. Однако они могут быть хелатированы и агрегированы с помощью ЭДТА-К2. Поэтому возникло предположение, что плазма с антикоагулянтом ЭДТА-К2 наиболее подходит для обнаружения антител к SARS-CoV-2.
В общей сложности 112 пациентов с диагнозом COVID-19 были зарегистрированы в респираторном отделении больницы Ханькоу в Ухане (Китай). Образцы их крови объемом 2 мл собирали в вакуумные пробирки четырех различных типов (для сыворотки с активатором свертывания; для плазмы с К2ЭДТА, цитратом натрия и лития гепарином). Аналогичные образцы крови были получены у 200 здоровых людей, у которых не было подтверждено инфицирование COVID-19. Затем специфические антитела IgM и IgG к SARS-CoV-2 в плазме и сыворотке были обнаружены с помощью GICA.
Результаты проведенных исследований показали, что плазма, обработанная антикоагулянтом ЭДТА-К2, имела более высокий уровень положительного обнаружения антител IgM, при этом на тест-полоске для обнаружения IgG присутствовал более темный цвет. Существенных различий между сывороткой и плазмой, обработанной антикоагулянтом, при использовании гепарина лития или цитрата натрия не наблюдалось.
У 200 здоровых контрольных пациентов были отрицательные антитела IgM и IgG к SARS-CoV-2. Это свидетельствует о том, что ЭДТА-К2 не увеличивает процент ложных срабатываний.
Кроме того, дополнительно проверялась связь положительного эффекта и применения пробирок с К2ЭДТА. Таким образом, у 32 из 112 пациентов с COVID-19 была собрана плазма в пробирки с К2ЭДТА и дополнительно была протестирована цельная кровь этих пациентов. Данные показали, что не было никакой разницы в способности обнаруживать антитела IgM или IgG к SARS-CoV-2 при использовании антикоагулированной плазмы крови или цельной крови с ЭДТА-К2. Соответствующие результаты убедительно продемонстрировали, что антикоагулированная плазма крови в присутствии ЭДТА-К2 улучшала показатели обнаружения антител IgM и IgG к SARS-CoV-2, и это было связано с ЭДТА-К2, а не с использованием сыворотки, плазмы или цельной крови.
Таким образом, в рамках исследования Китайских ученых Xiumei Hu, Changmeng Wu, Bo Situ и др. было установлено, что плазма с антикоагулянтом EDTA-K2 имела более высокий уровень обнаружения положительных результатов, чем другая антикоагулированная плазма (цитрат натрия и гепарин лития) или сыворотка крови. Дальнейшее исследование показало, что ЭДТА-К2 может усиливать положительный сигнал за счет хелатирования коллоидного золота. Поэтому вакуумные пробирки с К2ЭДТА лучше подходят для обнаружения антител к SARS-CoV-2.Мнение специалиста:
Широко распространенная угроза здоровью человека от SARS-CoV-2 в настоящее время настоятельно требует использования быстрых и точных аналитических методов диагностики, а также ответственного подхода к выбору расходных материалов.
Для подготовки статьи использовались следующие материалы:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7853433/
