Болезнь Альцгеймера (БА) является наиболее распространенной формой деменции. Высокую диагностическую точность выявления патологии болезни Альцгеймера показывают анализы плазмы крови на такие биомаркеры, как фосфорилированный белок тау181 (p-tau181) и фосфорилированный белок тау231 (p-tau231). Другими биомаркерами плазмы, которые могут помочь в диагностике БА, являются глиальный фибриллярный кислый белок плазмы (GFAP), а также соотношение амилоида-β 42 и амилоида-β 40 плазмы (соотношение Aβ42/Aβ40) и свет нейрофиламентов (NfL).
При этом температура и продолжительность хранения образцов влияют на получение корректных результатов. Исследований взаимосвязей данных преаналитических факторов и результатов тестов на амилоид-β (Aβ), тау, глиальный фибриллярный кислый белок (GFAP) и свет нейрофиламентов (NfL) существует не так уж и много.
Одно из подобных исследований оценки влияния продолжительности и температуры хранения плазмы на концентрации биомаркеров было проведено в Университетской больнице Ставангера (Норвегия) совместно с Университетской больницей Сальгренска (Швеция). Данное исследование было направлено на оценку стабильности сверхчувствительных анализов уровня p-tau181, p-tau231, GFAP, Aβ40, Aβ42 и NfL в плазме крови.
13 образцов плазмы, полученных после взятия крови в вакуумные пробирки с К2ЭДТА, в больничной лаборатории были перенесены пипеткой в полиэтиленовые криопробирки. После этого половину аликвот плазмы хранили при температуре +4 °C, а половину – при комнатной температуре, которая составляла около 18 °C. Одну аликвоту от каждой из этих двух групп замораживали при температуре -80°С в определенные моменты времени: 10:30, 12:30, 14:30, 16:30, 18:30 и 8:00 (следующего дня), что эквивалентно продолжительности хранения: примерно 2 часа, 4 часа, 6 часов, 8 часов, 10 часов и 24 часа после взятия крови. Затем замороженные образцы были доставлены в лабораторию для дальнейшего анализа.
Концентрации биомаркеров БА измеряли в шести временных точках: через 2, 4, 6, 8, 10 и 24 часа с помощью метода одномолекулярного ферментно-связанного иммуномассива (Simoa).
Результаты исследования показали, что концентрации p-tau181, p-tau231, NfL и GFAP не менялись как при хранении при температуре +4 °C, так и при температуре +18 °C. Концентрации амилоида-β 40 (Aβ40) и амилоида-β 42 (Aβ42) были стабильными в течение 24 часов при температуре +4 °C, но снижались при хранении при температуре +18 °C в течение более 6 часов. Но это снижение не повлияло на соотношение Aβ42/Aβ40.
Мнение специалиста:
Этап преаналитики является чрезвычайно важным для сверхчувствительных анализов крови, прогнозирующих патологию АД. Образцы плазмы можно хранить в течение 24 часов при температуре +4 °C, что даст достоверные результаты анализа на p-tau181, p-tau231, соотношение Aβ42/Aβ40, GFAP и NfL.
Для написания статьи использовались следующие источники:
https://alz-journals.onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/dad2.12439
