Автоматизация агрегационных тестов. Аргументы «ЗА»

Автоматизация агрегационных тестов. Аргументы «ЗА»

18 Мая 2022

Агрегация тромбоцитов – ведущее звено первичного (сосудисто-тромбоцитарного) гемостаза.


Тромбоциты – небольшие (2-9 мкм) безъядерные плоские форменные элементы крови, образующиеся из мегакариоцитов в костном мозге. Основные функции тромбоцитов: участие в механизмах регулирования реологического состояния крови через формирование тромбоцитарных агрегатов (белый тромб), запуск реакций плазменного гемостаза и участие в репарации и регенерации поврежденных тканей благодаря выделению факторов роста (основные факторы представлены в Таблице 1).



Таблица №1

Тромбоцитарный фактор роста

PDGF

Трансформирующий фактор роста

TGF-β

Фактор роста эндотелия сосудов

VEGF

Фактор роста эпителия

EGF

Фактор роста фибробластов

FGF

Инсулиноподобный фактор роста

IGF

После взаимодействия с коллагеном на поврежденной поверхности сосуда (адгезия) или другими, уже активированными тромбоцитами (биологические активаторы: тромбин, АДФ, тромбоксан А2), тромбоцит вступает в стадию активации. Активация – это быстрый и необратимый переход в новую формацию, сопровождающийся выбросом из цитоплазмы содержимого α-гранул, плотных гранул, лизосом, а также конформационными изменениями гликопротеине IIb/IIIa, экспрессией Р-селектина и фосфатидилсерина. После активации наступает заключительный этап первичного гемостаза – агрегация, характеризующаяся образованием «мягкого» белого тромба на поврежденной поверхности сосуда.

Методы оценки агрегационной функции тромбоцитов

Метод оптической детекции агрегации тромбоцитов (light transmission aggregometry (LTA)) – классический оптический метод О’Брайна и Борна – остается «золотым стандартом» для функциональной оценки тромбоцитопатий (Born, G. V. R., & Cross, M. J. (1963). The aggregation of blood platelets. The Journal of Physiology, 168(1), 178-195. doi:10.1113/jphysiol.1963.sp007185). Метод предполагает использование различных индукторов агрегации для диагностики нарушений функции тромбоцитов, дифференциальной диагностики кровотечений и оценки эффективности терапии антиагрегантами. При использовании оптического агрегометра с фиксированной длиной волны оценивается изменение светорассеивания после агрегации тромбоцитов в богатой тромбоцитами плазме (PRP) в присутствии индуктора (агониста) или без него (спонтанная агрегация).

Клинические рекомендации для использования агрегации тромбоцитов:

- для лечения пациентов с симптомами кровотечения (носовое кровотечение, кровоточивость десен, длительные меноррагии и т.п.), указывающими на первичные нарушения гемостаза

(Recommendations for the standardization of light transmission aggregometry consensus of the working party from the platelet physiology subcommittee of SSC/Journal of Thrombosis and Haemostasis, 11: 1183–1189);

- для оценки ответа на антиагрегантную терапию

(Bordet, J.-C., Negrier, C., Dargaud, Y., & Quellec, S. L. (2016). Comparison of current platelet functional tests for the assessment of aspirin and clopidogrel response. Thrombosis and Haemostasis, 116(10), 638–650. doi:10.1160/th15-11-0870);

- для лечения пациентов с наследственными заболеваниями системы гемостаза (болезнь фон Виллебранда, синдром Бернара-Сулье) и, в некоторых случаях, – для пациентов с Острым коронарным синдромом (ОКС).

Сложности лабораторной диагностики агрегационной функции тромбоцитов

Несмотря на важность исследований агрегационной функции тромбоцитов, в первую очередь, для пациентов на антиагрегантной терапии (гепарин, аспирин, клопидогел, прасугрел и т.д.), количество лабораторий, выполняющих эти тесты, минимально. Это связано с несколькими факторами: с необходимостью наличия дополнительного прибора – агрегометра; с отсутствием стандартизации (даже внутри LTA) между полуавтоматическими агрегометрами; и с необходимостью получения большого количества биологического материала (цельная кровь, плазма) пациента для каждого анализа.

Автоматизация агрегометрии – высокое качество диагностики и достоверность результатов

Наличие опции «агрегометрия» на автоматическом коагулометре позволит проводить диагностику у значительно большего количества пациентов. Это достоверный факт, так как, с учетом преаналитических особенностей, при подготовке к исследованию на параметры гемостаза, максимальное время транспортировки крови in vitro до прибора не должно превышать 4 часов. То есть лаборатория должна быть «рядом» с пациентом. На приборах, сочетающих методы оценки агрегационного и плазменного звена гемостаза, эта проблема уже решена (Frère, C., Kobayashi, K., Dunois, C., Amiral, J., Morange, P.-E., & Alessi, M.-C. (2017). Assessment of platelet function on the routine coagulation analyzer Sysmex CS-2000i. Platelets, 29(1), 95–97. doi:10.1080/09537104.2017.1353683).

Наличие опции с одинаковыми протоколами исследований агрегации тромбоцитов (на автоматическом оборудовании) позволит создать общую базу данных со статистическими параметрами. Эту базу можно будет использовать как основу для стандартизации метода.

И не менее важный аспект – качество биологического материала. Как упоминалось выше, для метода LTA необходима богатая тромбоцитами плазма (PRP). Тесты оценки функциональной активности тромбоцитов зависят от качества плазмы и должны в обязательном порядке проходить проверку на преаналитическом этапе лабораторной диагностики. Например, на HIL-детекторе автоматических коагулометров Sysmex серии CS с модулем агрегации и встроенным HIL-детектором (Lawrie, A. S., Kobayashi, K., Lane, P. J., Mackie, I. J., & Machin, S. J. (2013). The automation of routine light transmission platelet aggregation. International Journal of Laboratory Hematology, 36(4), 431–438. doi:10.1111/ijlh.12161).

Компания ООО «ОМБ» предлагает тесты для автоматизированной оценки функциональной активности тромбоцитов (АДФ, коллаген, эпинефрин, ристоцетин, арахидоновая кислота) на анализаторах серии CS: CS-2000i и CS-5100, разработанных компанией «Сисмекс» (РУ № РЗН 2020/11776 от 21.08.2020; 2020/11769 от 19.08.2020; 2020/11767 от 19.08.2020; 2020/11778 от 21.08.2020).
Вас может заинтересовать
Ошибки преаналитики
29.06.2022 16:33
Ошибки преаналитики
Недавний отчет исследователей из Медицинской школы Университета Джона Хопкинса в Балтиморе попал в заголовки американских газет..
Легкий перекус и гемостаз
28.06.2022 16:12
Легкий перекус и гемостаз
Группой ученых было проведено исследование, направленное на оценку того, может ли легкий прием пищи (например, завтрак) поставить под угрозу результаты лабораторных коагулологических тестов.
Влияние положения пациента при взятии крови на гематологические показатели
27.06.2022 15:58
Влияние положения пациента при взятии крови на гематологические показатели
Согласно рекомендациям института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) GP 41-A6, образцы крови должны..
09:32 05.07.2022
www.omb.ru
+7 (495) 925-81-50
C 9 до 18 по мск