Данное исследование было проведено на базе одного из учреждений, которое столкнулось с проблемой получения достоверных результатов исследований.
В лаборатории использовалась система COBAS Modular P (Roche Diagnostics, Швейцария). Образец крови пациента был взят в пробирку, содержащую гепарин и гель, отправлен с помощью пневмопочты в лабораторию. Параметры центрифугирования составили: 2000 g в течение 10 минут. При этом общее время транспортировки этого образца составило всего 8 минут.
Результаты исследования показали неправдоподобное значение концентрации глюкозы 0,06 ммоль / л. Повторное измерение того же образца привело к изменению уровня глюкозы до 5,4 ммоль / л.
Первоначально было принято решение исследовать потенциальные аналитические ошибки, но поскольку все значения внутреннего и внешнего контроля качества были на целевом уровне, а значения глюкозы в других образцах пациентов были корректными, исследователи обратили внимание на потенциальные преаналитические ошибки. При более внимательном исследовании проб был замечен сгусток белого материала, а также капли жира, плавающие на поверхности образца. Подобные изменения были обнаружены в небольшом количестве и в пробирках от других пациентов. При этом в части проб находились только капли жира или белые сгустки, в других же и капли жира и сгустки.
Некоторые из белых сгустков были видны невооруженным глазом, тогда как другие можно было обнаружить только с помощью цифровой камеры микроскопа.
После окрашивания белых сгустков красителем по методу по Май-Грюнвальду и оценки их под микроскопом исследователи идентифицировали включения как конгломерат фибриногена, тромбоцитов (PLT) и некоторых лейкоцитов (WBC). Капельки жира, скорее всего, образовались из разделительного геля в пробирках. Результаты исследований показали, что данных структур (включений), плавающих на поверхности пробирок с гепарином, было достаточно для образования временного сгустка в игле пробозаборника анализатора, в результате чего объем пробы на борту анализатора был значительно изменен, что и повлияло на получение такого неправдоподобного результата.
После проведения стандартного цикла очистки прибора в течение дня и замены пробирок на другую партию пробирок с гепарином и гелем проблемы удалось свести к минимуму.
И это был не единичный случай в мире.
Например, в 2003 году подобные включения были обнаружены в препаратах крови, собранных в пакеты для сбора крови Terumo. Дифференциальная интерференционная контрастная микроскопия показала, что в состав конгломератов входят лейкоциты, нити фибрина, окруженных эритроцитами.
Авторы статьи утверждают, что подобная ситуация может возникнуть в любой лаборатории, что сказывается в дальнейшем не только на результатах исследований, но и на работоспособности оптической системы.
Поскольку данные структурные включения в первую очередь обнаруживались в пробирках с гепарином, скорее всего, этот антикоагулянт является одним из провоцирующих факторов. Помимо самого реагент на появление конгломератов влияют и другие этапы преаналитического процесса, такие как условия транспортировки или центрифугирования или диапазон времени от момента сбора крови до центрифугирования. Вероятнее всего причиной формирования является сочетание нескольких факторов, включая PH, степень заполнения пробирок кровью, концентрацию гепарина и реологические особенности крови пациента.
Для тех лабораторий, которые сталкиваются с подобными проблемами, исследователи рекомендуют:
1. проводить дополнительную процедур очистки анализаторов
2. переходить на другую серию пробирок с гепарином
3. проводить инструктаж специалистов об условиях хранения пробирок для взятия крови
4. добавлять этап аликвотирования перед постановкой в аналитическую систему
А если это не решит проблему, использовать образцы сыворотки вместо образцов плазмы, если это возможно в соответствии с методиками исследований и рекомендациями производителя аналитических систем.
Мнение специалиста:
Данное исследование имеет большое значение, особенно для лабораторий с высокой производительностью, использующих первичные пробирки в своих анализаторах, а также для лабораторий, занимающихся аналогичными проблемами.
