Полуавтоматические агрегометры, такие как PFA-100, PFA-200 и их аналоги используются в большинстве медицинских учреждений по всему миру и демонстрируют высокую чувствительность к фактору фон Виллебранда и функциональным дефектам тромбоцитов, но иногда нечувствительны к специфическим незначительным нарушениям таким, например, как синдром Германски-Пудлака.
Но, методы оптической детекции агрегации тромбоцитов (light transmission aggregometry (LTA)) остаются "золотым стандартом" для функциональной оценки тромбоцитопатий. При использовании оптического агрегометра с фиксированной длиной волны оценивается изменение светорассеивания после агрегации тромбоцитов в богатой тромбоцитами плазме (PRP) в присутствии индуктора (агониста) или без него (спонтанная агрегация).
Тем не менее, полуавтоматические агрегометры имеют некоторые недостатки: узкая специализация оборудования, большие объемы крови для исследований, отсутствие стандартизации. Таким образом, очень немногие лаборатории готовы включать в свою работу эту группу тестов. Как итог – направление пациентов в специализированные медицинские учреждения и увеличение времени для подтверждения диагноза и начала лечения. Разработка новых технологий, аккумулирующих функции оценки плазменного и клеточного гемостаза – одна из важнейших задач снижения рисков критических состояний пациентов.
Настоящее исследование было проведено для оценки автоматизированных методик агрегации тромбоцитов и сравнения их параметров (тестов) с параметрами полуавтоматических агрегометров. В сравнительном исследовании были использованы: автоматизированный коагулометр, включающий в перечне тестов агрегационные,CS-2000i2 (Sysmex Corporation, Япония) и полуавтоматический агрегометр APACT 4004 (Elitech, Франция).
Для исследования была выбрана группа из 46 пациентов с различными геморрагическими нарушениями и 62 пациента с острым коронарным синдром (ОКС), получавшим двойную антитромбоцитарную терапию.
Агрегация измерялась оптическим методом, с использованием индукторов:АДФ 2,5/5/10 мкл, коллаген 3,3 мкг/мл, эпинефрин 10мкл, ристоцетин 1.25 мг/мл и арахидоновая кислота7 0.5 мг/мл в богатой тромбоцитами плазме (PRP), полученной при центрифугировании на скорости 800 об/мин.
Результаты измерений в параллелях показали высокие корреляции между CS-2000i и APACT 4004 после стимуляции всеми агонистами (р < 0.001).
Пациенты с геморрагическими нарушениями имели схожие агрегационные профили (графики) на обоих анализаторах.
У одного из пациентов была выявлена Тромбастения Гланцмана (синдром Гланцмана), подтвержденный проточной цитометрией.
Тесты показали нарушенную (низкую) агрегацию тромбоцитов в ответ на действия всех агонистов, за исключением ристоцетина.
Для пациентов с ОКС, получавших двойную антитромбоцитарную терапию, данные были сопоставимы для: 91% (49 из 54; κ = 0.706; P < 0.0001) при использовании индуктора АДФ - 2.5 мкл (г = 0.79;P <0.0001), 5 мкл (г = 0.92; P <0.0001), 10 мкл (r = 0.8963; P < 0.0001) и 94% (50 из 53) при использовании индуктора арахидоновая кислота (κ = 0.822; P < 0.0001).
Индукция прочими агонистами так же коррелировала по результатам, полученным на CS-2000i и APACT 4004. Индукторы: коллаген - 3.3 мкг/мл (r = 0.92;P < 0.0001); эпинефрин 10 мкл (г = 0.94; P < 0.0001); ристоцетин 1.25 мг/мл (г = 0.38; P = 0.0099).
Анализ графиков Бланда-Альтмана показал, что 95% функциональных различий между результатами пациентов находятся в приемлемом диапазоне для всех агонистов, что позволяет сделать вывод о сравнимости и воспроизводимости методик на анализаторах.
Тем не менее необходимо отметить, что и автоматизация агрегационных методик на базе автоматических коагулометров также имеет ряд недостатков. В первую очередь, это необходимость подготовки богатой тромбоцитами плазмы, во вторую – невозможность диагностики тромбоцитопений на этом оборудовании.
Автоматизированный расчет агрегации тромбоцитов на оборудовании CS-2000i (Sysmex Corporation, Япония) – это легкий, доступный широкому кругу лабораторий и более стандартизированный метод оценки функционального состояния тромбоцитов.
