Профилактика гликолиза и обмена ионами

В тот момент, когда кровь попадает в пробирку, начинают происходить важные и необратимые изменения. Результат, отражающий концентрацию анализируемого вещества в крови пациента настолько точно, насколько позволяет технология, можно обеспечить только правильным обращением с материалом.

Оказавшись вне кровеносного русла, кровь подвергается воздействию времени, температуры, света и других естественных факторов, которые влияют на нее вне кровеносной системы. В момент, когда кровь попадает в пробирку, начинается борьба с этими воздействиями, которая продолжается до момента проведения анализа. К факторам, изменяющим результаты анализа, относятся: свертывание, гликолиз и обмен ионами между сывороткой и эритроцитами. Свертывание (образование сгустков) можно предотвратить, правильно перемешивая содержимое пробирки с антикоагулянтом сразу после взятия крови. Однако для минимизации гликолиза и обмена ионами требуется правильное обращение с материалом в течение всего преаналитического этапа.

Гликолиз — это этап обмена глюкозы. Когда сыворотка или плазма остается в контакте с эритроцитами в ходе транспортировки и хранения образца, гликолиз может приводить к ложно заниженному показателю глюкозы. На пике активности гликолиз может снижать концентрацию глюкозы в сыворотке или плазме со скоростью до 200 мг/л/час. Этот процесс ускоряется при высокой температуре и при повышенном количестве лейкоцитов.

Если нет возможности сразу подвергнуть образцы центрифугированию, чтобы отделить сыворотку или плазму от клеток (например, кровь взята на дому или в учреждении, где нет лабораторного оборудования), уровень глюкозы можно сохранить двумя способами:
1) брать кровь в пробирки с фторидом натрия и оксалатом натрия или калия (пробирки с серыми крышками) – и это наиболее правильный и безопасный способ;
2) хранить и транспортировать образцы при низких температурах.

У обоих способов есть свои ограничения, и ни один из них не может заменить центрифугирование и отделение сыворотки/плазмы от клеток, когда одновременно кровь берется и на другие биохимические показатели. Например, консервация крови с помощью фторида или оксалата подходит для определения глюкозы и лактата
и не подходит для других анализируемых веществ. Поэтому, если назначены другие анализы, кровь на них должна собираться в другие пробирки.

Следует помнить, что при назначении глюкозы вместе с другими анализами из стандартных пробирок для исследования сыворотки, охлаждение не может служить надежным способом консервации глюкозы. Хотя охлаждение ингибирует гликолиз, оно также способствует обмену ионами из-за воздействия на естественный механизм, известный как натрий-калиевый насос (натрий-калиевая АТФ-аза). При комнатной температуре и выше этот насос выкачивает натрий из эритроцитов и закачивает калий внутрь. В результате концентрация калия в клетке оказывается в 23 раза выше, чем в плазме. Однако в холоде работа насоса ингибируется, позволяя большим количествам ионов K+ выходить из клетки в сыворотку или плазму. В результате в течение всего нескольких часов контакта плазмы с клетками уровень калия может существенно повыситься. Это приведет к нормальному показателю у пациента с угрожающим жизни снижением калия, что может иметь катастрофические последствия. Например, если пациент с низким уровнем калия сдает кровь на несколько анализов, включая электролиты, любая задержка в обработке и/или охлаждении образца перед центрифугированием может привести к утечке калия из клеток в сыворотку, завышая результат анализа и приводя его к нормальным значениям. Схожим образом, у пациента с нормальным калием результат может оказаться очень высоким, если образец неправильно хранили/транспортировали. В результате врач назначит препараты, выводящие калий из организма, и доведет пациента до опасной гипокалиемии.

Помимо судорог и смерти, при неверном определении уровня калия у пациентов существует опасность развития следующих осложнений:
• сердечной аритмии;
• нервно-мышечных нарушений;
• тетануса (судорог);
• остановки дыхания;
• нарушения функции почек.

Показатели, на которые влияет длительный контакт клеток с сывороткой
Повышаются:
Лактатдегидрогеназа (ЛДГ)
Фосфор (PO4+)
Аммиак (NH4−)
Калий (K+)
Креатинин
Витамин B12
АлАТ
АсАТ

Понижаются:
Глюкоза
Ионизированный кальций (Ca++)
Бикарбонат (CO2)
Фолиевая кислота

Глюкоза и калий — это не единственные аналиты, концентрация которых меняется при длительном контакте эритроцитов с сывороткой.
Для предотвращения изменений действительных параметров исследуемого образца крови CLSI рекомендует центрифугировать и разделять материал, который берется на рутинный биохимический анализ, в течение не более 2 часов после взятия, если только нет доказательств, что более длительный контакт не повлияет на точность. Следовательно, если назначен один из этих анализов, или есть вероятность, что, пока материал хранится, может произойти дополнительное назначение, то сыворотка/плазма должна быть отделена в течение 2 часов после взятия крови. Это можно сделать, собрав материал в пробирку с разделительным гелем и центрифугировав ее в первые 2 часа.
Всегда нужно помнить, что выбор пробирки определяется методикой исследования каждого аналита. При возможности выбора нескольких методик предпочтение отдается пробиркам, содержащим специальные консерванты. Это позволяет стабилизировать пробу и сохранить концентрацию аналита на должном уровне без необходимости применения сложных этапов пробоподготовки.

Мнение специалиста:
Правильное взятие материала играет огромную роль, однако влияние медработника, занимающегося взятием крови, не заканчивается в момент наполнения пробирки. Невнимательное отношение к ошибкам, которые могут возникнуть в процессе обработки, хранения и транспортировки образца, способна привести к значительному изменению результатов анализов. Если медработник не знает и не избегает возможных ошибок, возникающих между взятием крови и анализом в лаборатории, полученные результаты окажутся неверными, что отразится на диагностике, лечении и тактике ведения пациента, в том числе — с угрожающими жизни последствиями.